Kui rakud, milles me kultiveerime

raku tehason saastunud, enamikku neist on raske käsitseda.Kui saastunud rakud on väärtuslikud ja neid on raske uuesti kätte saada, võib nende eemaldamiseks kasutada järgmisi meetodeid.

1. Kasutage antibiootikume

Antibiootikumid on bakterite hävitamisel tõhusamadraku tehased.Kombineeritud ravimid on tõhusamad kui ainult ravimid.Ennetavad ravimid on tõhusamad kui ravimid pärast saastumist.Ennetusravis kasutatakse tavaliselt topeltantibiootikumi (penitsilliin 100 u/ml pluss streptomütsiin 100 µg/mL).Pärast saastumist peab puhastusmeetod olema 5–10 korda suurem kui tavaline kogus.Ravimit tuleb kasutada 24–48 tundi pärast lisamist ja seejärel asendada tavapärase rutiiniga.Kultuurivedelik.See meetod võib olla tõhus saastumise varases staadiumis.Lisaks penitsilliinile ja streptomütsiinile võivad kasutatavad antibiootikumid hõlmata ka gentamütsiini, kanamütsiini, polümüksiini, tetratsükliini, nüstatiini jne. Tavaliselt kasutatakse 400–800 μg/ml kanamütsiini või 200 μg/mL tetratsükliini.Söödet vahetatakse iga 2–3 päeva järel ja seda antakse edasi 1–2 põlvkonna jooksul raviks.Viimastel aastatel on teatatud, et 4-fluoro-, 2-hüdroksükinoliin (Ciprofloxacin, Cip), Pleu-romutiliini derivaat (Pleu-romutiliini derivaat, BM-Cyclin2: BM-1 ja tetratsükliini derivaat (BM-2)) Antibiootikumid on tõhus mükoplasma hävitamisel, kui seda kasutatakse eraldi või kombinatsioonis.Kõik need kolm antibiootikumi valmistatakse 250-kordseteks kontsentreeritud lahusteks PBS-is ja säilitatakse hilisemaks kasutamiseks temperatuuril -20 °C.Kasutuskontsentratsioon Cip on 10 μg/mL, BM-1 on 10 μg/mL ja BM-2 on 5 μg/ml.Kasutamisel aspireerige esmalt saastunud sööde, lisage BM-1 sisaldav RPMI1640 sööde, seejärel aspireerige sööde 3 päeva pärast, lisage BM-2 sisaldav RPMI1640 sööde ja kasvatage 4 päeva ja nii edasi 3 päeva järjest. .ringid, kuni 33258 fluorestsentsvärvimismikroskoopiaga tõestatakse, et mükoplasma on elimineeritud, seejärel lisatakse kultiveerimiseks ja passaažiks 3-4 korda normaalset söödet.

2. Kuumtöötlus

Saastunud koekultuuri inkubeerimine temperatuuril 41 °C 18 tundi võib mükoplasma tappa, kuid sellel on rakkudele kahjulik mõju.Seetõttu tuleks enne ravi läbi viia esialgne test, et uurida kuumutamisaega, mis võib mükoplasma maksimaalselt tappa ja rakke kõige vähem mõjutada.See meetod on mõnikord ebausaldusväärne.Kui ravida esmalt ravimitega ja seejärel kuumutada 41°C juures, on efekt parem.

3. Kasutage mükoplasmaspetsiifilist seerumit

Mükoplasma saastumise saab eemaldada 5% küüliku mükoplasma immuunseerumiga (hemaglutinatsiooni tiiter 1:320 või üle selle).Kuna spetsiifiline antikeha võib pärssida mükoplasma kasvu, muutub see negatiivseks 11 päeva pärast antiseerumi ravi ja jääb negatiivseks 5 kuud hiljem.on negatiivne.See meetod on aga tülikam ning mitte nii mugav ja ökonoomne kui antibiootikumide kasutamine.

4. Muud meetodid

Lisaks ülalnimetatud saaste eemaldamise meetoditele on olemas ka loomade inokuleerimise ja steriliseerimise meetodid, makrofaagide fagotsütoosi meetodid, bromouratsiili lisamise meetodid saastunud ainetele.kultuuripudelidja siis kiiritades neid valgusega ja filtreerimismeetoditega jne, aga need kõik on tülikamad ja ebaefektiivsemad.Seetõttu visatakse mükoplasmaga saastumise korral see üldiselt kõrvale ja kultiveeritakse uuesti, välja arvatud juhul, kui see on eriti oluline.

võtke ühendust Whatsappi ja Wechatiga: +86 180 8048 1709